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ELISA試劑盒試驗中出現的差錯如何糾正?

更新時間:2020-01-25      點擊次數:1356
       ELISA試劑盒的使用過程中,有時會出現一些差錯,那這些差錯如何糾正呢,我們需要找出原因。ELISA試劑盒操作過程多,新手操作不免會有過失。而這些過失許多是由細節不夠好構成的,削減過失的方法有許多,下面我們就來說說ELISA試劑盒試驗中出現的差錯的糾正方法。
  1. 評價試(shi)劑(ji)的實用(yong)(yong)性,試(shi)劑(ji)的穩定(ding)與否,對率(lv)的凹(ao)凸到頭重要(yao)。在(zai)試(shi)劑(ji)啟(qi)用(yong)(yong)前,應(ying)進行陰、陽(yang)對照及(ji)樣(yang)品(pin)重復(fu)對比試(shi)驗,斷(duan)定(ding)試(shi)劑(ji)符合要(yao)求(qiu)后方可運用(yong)(yong)。
  2. 操(cao)作前(qian)仔細閱讀說(shuo)(shuo)明(ming)書,嚴(yan)峻依(yi)照說(shuo)(shuo)明(ming)書要求進(jin)行規范化操(cao)作。不同批號的(de)試(shi)劑不可混用。值得改(gai)(gai)善的(de)當地,重復試(shi)驗斷定成立后才干(gan)改(gai)(gai)善,比如洗板次數(shu)的(de)掌握等。
  3. 加(jia)(jia)樣要(yao)、快(kuai)速。加(jia)(jia)樣不(bu),酶(mei)生成物的(de)量(liang)不(bu)能斷(duan)定(ding)(ding),直接影響(xiang)顯(xian)(xian)色作(zuo)用(yong)。其他,顯(xian)(xian)色的(de)深(shen)淺(qian)及A值的(de)測(ce)定(ding)(ding)與(yu)參(can)加(jia)(jia)顯(xian)(xian)色劑(ji)和間斷(duan)液的(de)量(liang)有關,所(suo)以加(jia)(jia)樣應穩(wen)重。要(yao)求在必(bi)定(ding)(ding)時刻內加(jia)(jia)樣完畢的(de)試驗,假如加(jia)(jia)樣緩慢,便呈現(xian)過失,而且試劑(ji)長時刻顯(xian)(xian)露在外(wai),特別室溫(wen)過高時,保存期會縮短乃至失效。
  4. 查驗(yan)技師應具有從事試(shi)驗(yan)室操作的(de)基(ji)本素質和(he)實踐經驗(yan)。能熟練操作試(shi)驗(yan)儀器、器械,具有必定(ding)總(zong)結和(he)剖析問題的(de)才干(gan),對試(shi)驗(yan)中呈(cheng)現的(de)意外狀(zhuang)況能及時妥善解決(jue)。
  5. 運(yun)用(yong)校對(dui)過的微(wei)量(liang)移液器,清掃天(tian)然過失(shi)。移液器與否對(dui)定量(liang)檢測尤為重要。
  6. 嚴峻掌握(wo)顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se)時(shi)刻,顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se)時(shi)刻過短,參(can)加(jia)間斷液反應間斷后,底物結合物的量(liang)過少,易(yi)呈現(xian)假(jia)陰性(xing)。超越顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se)要求時(shi)刻后顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se),應判(pan)為假(jia)陽性(xing),這或許與試劑本身有關。加(jia)顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se)劑后當即(ji)顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se),不(bu)可(ke)報陽性(xing),這或許是本底顯(xian)(xian)(xian)色(se)(se)的作用。
  7. 洗刷*,洗板不*,酶結合(he)物本(ben)底顯色會呈(cheng)現假陽性。其他,洗刷液要新鮮,現用現配,陳腐的洗刷液會呈(cheng)現本(ben)底增(zeng)高現象,也或(huo)許呈(cheng)現假陽性。
  8. 嚴控反(fan)應時刻(ke)(ke),反(fan)應時刻(ke)(ke)過長,酶失活;反(fan)應時刻(ke)(ke)過短,酶結(jie)合物不能與血清中的微生物抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)充沛結(jie)合,生成物結(jie)構(gou)(gou)松懈不強健,簡略(lve)洗(xi)掉(diao),都或許(xu)構(gou)(gou)成假陰性。

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