人 胃泌素（Gastrin）ELISA試劑盒

工作(zuo)原理

本(ben)試劑盒采用雙(shuang)位點(dian)夾心酶聯免疫吸附(fu)法（ELISA），測定樣(yang)品中人胃(wei)泌素(Gastrin)的水平。向預先包(bao)被人胃(wei)泌素(Gastrin)抗體(ti)的酶標孔中加入標準品(pin)、待測樣本(ben)和HRP標記的胃泌素(Gastrin)抗體，經過溫育和(he)洗滌，去除(chu)未(wei)結合的組分，然(ran)后再加入底(di)物(wu)A、B，產生(sheng)藍色(se)，并(bing)在酸的作(zuo)用(yong)下轉化(hua)成zui終的黃色。顏(yan)色(se)的深淺與樣品中人胃泌素(Gastrin)的濃(nong)度(du)呈正相關。

人 胃泌素（Gastrin）ELISA試劑盒 組成

注(zhu)：標準品(pin)用標準品(pin)稀釋液依(yi)次稀釋為：100、50、25、12.5、6.25、0 pg/ml

需要而未提供的(de)試(shi)劑和器(qi)材(cai)

1. 37℃恒溫箱。
2. 標準規(gui)格酶標儀。
3. 精密移液器及(ji)一次性吸頭
4. 蒸餾水，
5. 一次性試管
6. 吸(xi)水紙

注意事項

1. 從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室(shi)溫平衡(heng)至少30分鐘。酶標包被板開封后(hou)如未(wei)用完，板條應裝入密封袋中保(bao)存。
2. 各步加(jia)樣(yang)均應使用(yong)加(jia)樣(yang)器(qi)，并(bing)經(jing)常校對其準確性，以避免試驗誤(wu)差(cha)
3. 建議所有標準品、樣本(ben)都做(zuo)雙份檢測。
4. 嚴格按照說(shuo)明書的操作進行，試(shi)驗結果判(pan)定必(bi)須以(yi)酶(mei)標儀讀數為準.
5. 為避(bi)免(mian)交叉污染(ran)，要避(bi)免(mian)重復使用手中的吸頭和封板(ban)膜。
6. 不(bu)用(yong)的(de)其它試劑應包裝好(hao)(hao)或(huo)蓋好(hao)(hao)。不(bu)同(tong)批號的(de)試劑不(bu)要(yao)混用(yong)。保質(zhi)前使用(yong)。
7. 底物(wu)B對光(guang)敏感(gan)，避免長時間暴露于光(guang)下。

洗板方法(fa)

手(shou)工(gong)洗(xi)板(ban)方法：甩掉酶(mei)(mei)標板(ban)內(nei)的(de)液(ye)體；在實驗臺(tai)上鋪墊幾層吸水紙，酶(mei)(mei)標板(ban)朝(chao)下用力拍幾次；將稀釋后的(de)洗(xi)滌液(ye)至少0.35ml注(zhu)入孔(kong)內，浸泡1-2分鐘。根據(ju)需要，重復此過程數次。

自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正(zheng)式實驗過(guo)程(cheng)中

標本要求

1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根(gen)過(guo)氧化物酶的（HRP）活性(xing)。

2．標本采集(ji)后(hou)盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后(hou)應盡快進行實驗。若不能馬(ma)上進行試驗，可將(jiang)標本放于-20℃保存，但應避免反復凍(dong)融(rong)

操作程序(xu)

1. 分別設空(kong)白孔（空(kong)白對照孔不加樣(yang)品(pin)及(ji)酶(mei)(mei)標(biao)(biao)試劑，其余(yu)各步操作相同）、標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)孔、待測樣(yang)品(pin)孔。在酶(mei)(mei)標(biao)(biao)包被板上標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)孔中加入標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)50μl；在酶標包被板上待測(ce)樣(yang)品(pin)孔中先加樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40μl，然后再加待(dai)測樣品10μl（樣品zui終稀(xi)釋(shi)度為5倍(bei)）。每(mei)孔加入酶標試(shi)劑50μl，空白(bai)孔除外。輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun)，37℃溫育60分(fen)鐘。
2. 棄去液體(ti)，甩干(gan)，每孔加(jia)滿稀釋(shi)后洗滌液，振(zhen)蕩30秒，甩去洗滌液，用吸(xi)水紙拍干。如此重復5次，拍干。
3. 每(mei)孔先加入(ru)顯色劑A50μl，再(zai)加入顯色劑(ji)B50μl，輕輕震蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光顯色15分鐘.
4. 取出(chu)酶標板(ban)，每孔(kong)加終(zhong)止液(ye)50μl，終止反應(ying)（此時藍色立轉黃(huang)色）。
5. 測定：以空白孔調零，在(zai)450nm波長下測量各孔(kong)的吸光度值(zhi)（OD值）。 測定應在加終止液(ye)后15分鐘以(yi)內進(jin)行。
6. 根據標準(zhun)品的濃度(du)及對應(ying)的OD值(zhi)計算出標準曲線的直(zhi)線回歸(gui)方程(cheng)，再根據樣(yang)品的OD值(zhi)在(zai)回歸方(fang)程上計算出對應(ying)(ying)(ying)的樣品(pin)濃度。也可以使用各(ge)種應(ying)(ying)(ying)用軟件來計算。應(ying)(ying)(ying)記住由于樣品(pin)稀釋了(le)的，其實際濃度應(ying)(ying)(ying)該乘以總(zong)稀釋倍數。

人  

人