詳細請咨(zi)詢銷售人員：

甲狀旁腺素（PTH）ELISA 試劑盒(he)

應用于ELISA

親和(he)(he)素(su)(su)(su)是一(yi)種糖蛋白(bai)，可(ke)由蛋清中提(ti)取(qu)。分(fen)子(zi)(zi)(zi)量60kD，每(mei)個分(fen)子(zi)(zi)(zi)由4個亞基組成(cheng)，可(ke)以和(he)(he)4個生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)分(fen)子(zi)(zi)(zi)親密(mi)結合(he)(he)(he)(he)。維(wei)生素(su)(su)(su)H，分(fen)子(zi)(zi)(zi)量244.31，存在于蛋黃中。用化(hua)學方法制成(cheng)的(de)(de)(de)衍生物(wu)(wu)，生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可(ke)與蛋白(bai)質、糖類(lei)和(he)(he)酶等多種類(lei)型(xing)的(de)(de)(de)大小分(fen)子(zi)(zi)(zi)形(xing)成(cheng)生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)化(hua)的(de)(de)(de)產物(wu)(wu)。親和(he)(he)素(su)(su)(su)與生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)的(de)(de)(de)結合(he)(he)(he)(he)，雖(sui)不(bu)屬免疫反應(ying)，但特異性強，親和(he)(he)力大，兩(liang)者(zhe)一(yi)經結合(he)(he)(he)(he)就(jiu)極為穩定。由于1個親和(he)(he)素(su)(su)(su)分(fen)子(zi)(zi)(zi)有4個生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)分(fen)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)結合(he)(he)(he)(he)位置，可(ke)以連接更(geng)多的(de)(de)(de)生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)化(hua)的(de)(de)(de)分(fen)子(zi)(zi)(zi)，形(xing)成(cheng)一(yi)種類(lei)似晶格的(de)(de)(de)復合(he)(he)(he)(he)體。因此把親和(he)(he)素(su)(su)(su)和(he)(he)生物(wu)(wu)素(su)(su)(su)與ELISA偶聯起(qi)來，就(jiu)可(ke)大提(ti)高ELISA的(de)(de)(de)敏感度。

親和(he)素(su)(su)(su)(su)－生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)(su)(su)(su)系統在ELISA中的(de)應(ying)用(yong)(yong)有(you)多(duo)種形式，可(ke)用(yong)(yong)于間接(jie)包被(bei)，亦可(ke)用(yong)(yong)于終(zhong)反(fan)(fan)應(ying)放大。可(ke)以(yi)在固相(xiang)上先預包被(bei)親和(he)素(su)(su)(su)(su)，原(yuan)(yuan)用(yong)(yong)吸(xi)附(fu)法包被(bei)固相(xiang)的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)與生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)(su)(su)(su)結(jie)(jie)合(he)，通過親和(he)素(su)(su)(su)(su)－生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)(su)(su)(su)反(fan)(fan)應(ying)而(er)使(shi)生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)(su)(su)(su)化的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)在相(xiang)化。這種包被(bei)法不僅可(ke)增加吸(xi)附(fu)的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)量，而(er)且使(shi)其結(jie)(jie)合(he)點充分暴露。另外，在常規ELISA中的(de)酶(mei)標抗(kang)(kang)(kang)(kang)體也可(ke)用(yong)(yong)生(sheng)(sheng)物(wu)素(su)(su)(su)(su)化的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)體替(ti)代，然后連(lian)接(jie)親和(he)素(su)(su)(su)(su)－酶(mei)結(jie)(jie)合(he)物(wu)，以(yi)放大反(fan)(fan)應(ying)信(xin)號。

甲狀(zhuang)旁(pang)腺素（PTH）ELISA 試(shi)劑盒

定性測定
　　　定(ding)(ding)性測(ce)定(ding)(ding)的(de)(de)結果(guo)判斷是對受(shou)檢標(biao)本中是否含有待測(ce)抗原或(huo)抗體作出"有"或(huo)"無(wu)"的(de)(de)簡單回答，分別用(yong)(yong)"陽(yang)性"、"陰性"表(biao)示。"陽(yang)性"表(biao)示該標(biao)本在該測(ce)定(ding)(ding)系統(tong)中有反(fan)(fan)應。"陰性"則為無(wu)反(fan)(fan)應。用(yong)(yong)定(ding)(ding)性判斷法(fa)也可得到(dao)半定(ding)(ding)量(liang)(liang)結果(guo)，即用(yong)(yong)滴(di)(di)度(du)來表(biao)示反(fan)(fan)應的(de)(de)強(qiang)度(du)，其實質仍是一(yi)個定(ding)(ding)性試驗。在這種半定(ding)(ding)量(liang)(liang)測(ce)定(ding)(ding)中，將標(biao)本作一(yi)系列稀釋后進行試驗，呈(cheng)陽(yang)性反(fan)(fan)應的(de)(de)高稀釋度(du)即為滴(di)(di)度(du)。根據滴(di)(di)度(du)的(de)(de)高低，可以判斷標(biao)本反(fan)(fan)應性的(de)(de)強(qiang)弱，這比觀察不稀釋標(biao)本呈(cheng)色的(de)(de)深淺判斷為強(qiang)陽(yang)性、弱陽(yang)性更具定(ding)(ding)量(liang)(liang)意義。

在間(jian)接法和夾心法ELISA中(zhong)，陽性(xing)孔(kong)呈色(se)深于陰性(xing)孔(kong)。在競爭法ELISA中(zhong)則相反，陰性(xing)孔(kong)呈色(se)深于陽性(xing)孔(kong)。

操(cao)作程序

1.   分(fen)別設空白(bai)孔（空白(bai)對照孔不加樣品(pin)(pin)及酶標試(shi)劑，其余各步操作(zuo)相(xiang)同）、標準(zhun)品(pin)(pin)孔、待測樣品(pin)(pin)孔。在酶標包被板上標準(zhun)品(pin)(pin)孔中(zhong)加入標準(zhun)品(pin)(pin)50μl；在酶標包被板(ban)上待測(ce)樣品孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品稀釋液40μl，然后(hou)再加待測(ce)樣品10μl（樣品zui終稀釋(shi)度為5倍）。每(mei)孔加入(ru)酶標試劑50μl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外。輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混勻，37℃溫育60分鐘。

2.   棄去液體，甩干(gan)，每孔加滿(man)稀釋后(hou)洗(xi)滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水(shui)紙(zhi)拍干。如此重復5次，拍干(gan)。

3.   每孔先加入顯色劑A50μl，再加(jia)入顯色(se)劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避(bi)光顯色15分鐘.

4.   取出酶標(biao)板(ban)，每孔加終止液50μl，終止(zhi)反應（此時藍色立轉(zhuan)黃色）。

5.   測定：以空白孔調(diao)零，在450nm波長(chang)下測(ce)量各孔(kong)的吸(xi)光度值（OD值）。 測定(ding)應(ying)在加終止液后(hou)15分鐘以內(nei)進行。

6.   根據標準品的濃度(du)及對(dui)應的OD值計(ji)算出標準曲線的直線回歸方(fang)程，再根據(ju)樣品的OD值在(zai)回歸方(fang)程上計(ji)算(suan)出對應的樣品濃度。也可以使用各(ge)種應用軟件來計(ji)算(suan)。應記住由于樣品稀釋了的，其實際(ji)濃度應該(gai)乘以總(zong)稀釋倍數。