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腎上腺素（EPI）ELISA 試劑盒

ELISA的試劑

在臨床檢驗中一般采用(yong)商品試劑(ji)盒進(jin)行測定。ELISA中有三個必要的試劑(ji)：免疫吸附劑(ji)、結合物(wu)和酶的底物(wu)等。完整(zheng)的ELISA試劑(ji)盒包含以下各組分：

⑴已包(bao)被抗原或抗體(ti)的(de)固相載(zai)體(ti)（免(mian)疫吸附劑）；

⑵酶標記的(de)抗原或(huo)抗體（結合物）；

⑶酶的底物；

⑷陰性對照品(pin)(pin)和陽性對照品(pin)(pin)（定(ding)性測定(ding)中），參考標準(zhun)品(pin)(pin)和控(kong)制血(xue)清（定(ding)量測定(ding)中）；

⑸酶(mei)聯物(wu)（結合物(wu)）及(ji)標(biao)本的稀(xi)釋液；

⑹洗滌液；

⑺酶反應終止液。

腎上腺素（EPI）ELISA 試劑盒(he)

定量測定

ELISA操作步驟(zou)復雜，影(ying)響(xiang)反應因素較多(duo)，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批(pi)測試均須用一(yi)系列不(bu)同濃(nong)(nong)度的參考標準(zhun)品(pin)在相同的條件(jian)下(xia)制(zhi)作標準(zhun)曲(qu)(qu)(qu)線。測定大分子量物質的夾(jia)心法ELISA，標準(zhun)曲(qu)(qu)(qu)線的范圍一(yi)般較寬，曲(qu)(qu)(qu)線高(gao)點(dian)的吸(xi)光(guang)度可接近2.0，繪制(zhi)時(shi)常(chang)用半對數值，以(yi)檢(jian)測物的濃(nong)(nong)度為橫(heng)坐標，以(yi)吸(xi)光(guang)度為縱坐標，將各濃(nong)(nong)度的值逐點(dian)連接，所得(de)曲(qu)(qu)(qu)線一(yi)般呈S形，其頭、尾部曲(qu)(qu)(qu)線趨于(yu)平坦，中央較呈直線的部分是理想的檢(jian)測區域。

測定(ding)小分子量物質常(chang)用競爭法，其標準曲(qu)線中吸光(guang)度與受檢物質的濃度呈(cheng)負相關。標準曲(qu)線的形狀因(yin)試劑盒所用模式的差別而(er)略有(you)(you)不同。ELISA測定(ding)的標準曲(qu)線注意圖中橫坐標為對數關系(xi)，這更有(you)(you)利于(yu)測定(ding)系(xi)統(tong)的表(biao)達。

操作程序

1.   分別設空白(bai)孔(kong)(kong)（空白(bai)對照孔(kong)(kong)不(bu)加(jia)樣品(pin)及酶標(biao)試(shi)劑，其余(yu)各步操作(zuo)相同）、標(biao)準品(pin)孔(kong)(kong)、待(dai)測樣品(pin)孔(kong)(kong)。在酶標(biao)包(bao)被板上(shang)標(biao)準品(pin)孔(kong)(kong)中加(jia)入標(biao)準品(pin)50μl；在酶標包被(bei)板上(shang)待測(ce)樣品孔(kong)中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。每(mei)孔加入酶標試劑50μl，空白孔(kong)除外。輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻，37℃溫(wen)育60分鐘。

2.   棄去液體，甩干，每孔(kong)加(jia)滿稀(xi)釋(shi)后(hou)洗滌液，振(zhen)蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。如此重復5次，拍干。